熒光免疫組化

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免疫組化原理
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實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,後者包括組織印片、細胞爬片和細胞塗片。

其中石蠟切片是製作組織標本最常用、最基本的方法,對於組織形態保存好,且能作連續切片,有利於各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片製作過程對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進行抗原修複,是免疫組化中選的組織標本製作方法。

免疫組化原理

抗體

免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體,單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物製備。多克隆抗體是將純化後的抗原直接免疫動物後,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。

常用染色方法

根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,後者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利於微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。


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