組織芯片製備

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組織芯片的製備步驟介紹

2020-01-15

組織芯片的製備步驟

  根據製作方法,可以分為石蠟包埋的組織芯片和冰凍芯片兩種。腫瘤中常用的是石蠟包埋的組織芯片,通過組織芯片製作機細針打孔的方法,從眾多的組織蠟塊(稱為供體蠟塊)中采集到數十至上百的圓柱形小組織(組織芯),並將其整齊排列另一空白蠟塊(稱為受體蠟塊)中,而製成組織芯片蠟塊。然後對組織芯片蠟塊進行切片,再將切片轉移到載玻片上製成組織芯片。
  其製作步驟如下:

  製作模具蠟塊,大小為45mm×20mm,在模具蠟塊上打出間距為0.1 mm、直徑為0.6 mm 的小孔,每個小孔以坐標準確定位;

  樣本蠟塊根據HE染色觀察,對石蠟標本中有代表性的點進行標記,包括典型的腫瘤和相應的正常組織,選定並分別在HE切片和相應石蠟組織塊上標記取樣組織的位點,用內徑0.6 mm 的不鏽鋼針進行穿刺,深度2~3mm,將其固定於模具蠟塊的小孔內;

  切片前,蠟塊需在4中預冷4h左右,然後夾在切片機上進行修正,等修到全部組織完整為止。用-20預冷冰袋貼在蠟塊上5-10min左右,快速連續切片30-50張左右,再用冰袋冷凍組織塊。

  將模具蠟塊以4μm厚度切片,敷貼於載玻片或尼龍膜等固相載體上,就製成了組織芯片。

組織芯片

  圖:組織芯片製備流程示意圖


  小結與展望

  組織芯片作為一項新興的生物學研究技術, 正以它優越性展示著自己的潛力。它的應用實現了對細胞、蛋白、核酸等生物組分的準確、快速、大信息量的檢測,使實驗效率大大提高。同時與二代測序技術配合使用,在尋找腫瘤基因變異及分子標誌物中有很好的互補作用,提供了腫瘤診斷和預後的分子標誌物的批量檢測,在腫瘤研究中發揮著不可取代的作用。成版人小视频app相信,在生命科學飛速發展的後基因組時代,組織芯片將在腫瘤研究中發揮越來越重要的作用。

 


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